任何顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀后都會(huì )在柱子進(jìn)口端被篩板擋住,zui后的結果是將柱子堵塞,表現出的特征是系統壓力增加并使色譜峰變形。因此,要采取各種預防 措施,包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過(guò)濾設計,努力防止或減少顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀中,從而延長(cháng)儀器和色譜柱的使用壽命,并進(jìn)步數據的可靠性。
在液相色譜儀中,顆粒物的主要來(lái)源有三個(gè)途徑:活動(dòng)相、被測樣品和儀器系統部件的磨損物。
1、被測樣品
使用針筒式過(guò)濾器不可能100%得到通過(guò)過(guò)濾器的被測樣品,總會(huì )或多或少的丟失。丟失來(lái)自這樣幾方面:過(guò)濾器濾膜的吸附、過(guò)濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過(guò)濾器與針筒連接處的滲漏等?! ?br /> 2、活動(dòng)相
無(wú)論是液相色譜儀HPLC級的水還是在實(shí)驗室使用超純水凈化系統制備的水,zui后一步也是通過(guò)0.2μm微孔濾 膜。任何一種緩沖液中加進(jìn)了固體物,必然活動(dòng)相過(guò)濾將。少量雜質(zhì)顆粒存在于活動(dòng)相中必然成為殘渣。
解決辦法:2. 1.活動(dòng)相制備僅采用HPLC級液體時(shí)不需要過(guò)濾,反之所有活動(dòng)相組成在使用前必須過(guò)濾。
2.2在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端進(jìn)口采用下沉式過(guò)濾器(常見(jiàn)材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個(gè)過(guò)濾器的規格為≥10μm的微孔物質(zhì),所以它不能取代活動(dòng)相過(guò)濾步驟,但是它能除往系統中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。
2.3.推薦在HPLC系統中采用一個(gè)0.45 或0.5μm的在線(xiàn)多孔過(guò)濾器,接在自動(dòng)進(jìn)樣器和柱子之間,即使已使用了保護柱。這個(gè)在線(xiàn)過(guò)濾器將成為擋板代替柱頭的濾板,而且如采用一個(gè)玻璃砂芯濾板, 既便宜,更換又方便(幾分鐘就可更換)。若采用在線(xiàn)過(guò)濾,液相色譜儀檢測每批樣品開(kāi)始前記錄下壓力值,當壓力上升一定值,例如25%或增加 500psi,應該更換玻璃砂芯濾板了,更換以后沖洗幾分鐘系統將恢復到原來(lái)的壓力值。
3、儀器系統部件的磨損物
zui后,在液相色譜儀HPLC系統中顆粒物的另一個(gè)主要來(lái)源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。
3.1、在一般實(shí)驗室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個(gè)月到一年,因此建議半年或一年更換這些密封墊?! ?/span>
3.2、原裝密封墊的密封效果,更換以后輕易引起活動(dòng)相滲漏。所以,只要不漏液就不要輕易更換密封墊。