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賽默飛離心小課堂 |如何利用超速離心法純化外泌體
更新時(shí)間:2019-07-03   點(diǎn)擊次數:3612次

細胞作為我們生命小的單位,我們有宏觀(guān)的溝通,他們自然也有微觀(guān)的溝通。而這細胞的“語(yǔ)言”,就是外泌體系統。

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外泌體系統的意義

簡(jiǎn)單的來(lái)說(shuō),細胞通過(guò)分離自己的一部分膜,把自己“情話(huà)”(核酸,蛋白等)包裹成外泌體釋放出去,后融入到別的細胞里進(jìn)行溝通。對于我們人類(lèi)來(lái)說(shuō),破解了外泌體系統等于破解了細胞溝通的密碼,對于我們生命科學(xué)發(fā)展意義非凡。

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用超速離心法純化外泌體

研究外泌體的步,那一定是得先把這些小家伙給抓住。雖外泌體分離市場(chǎng)上百花齊放。 但這些分離技術(shù)都在純度上不盡人意。得到純的外泌體,揭開(kāi)他們背后的故事,超速離心技術(shù)是非常好的選擇。

那么,

如何選擇合適的離心機

進(jìn)行外泌體離心分離?

賽默飛世爾是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的先鋒,旗下離心機產(chǎn)品一直以安全可靠與無(wú)微不至的便捷性著(zhù)稱(chēng)。

?Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速離心機

的離心性能:大離心力達802,000 xg,滿(mǎn)足外泌體純化實(shí)驗需要

多樣的轉頭選擇可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器,滿(mǎn)足您實(shí)驗室離心各種應用的需要,盡顯無(wú)以倫比的便捷性。

·Auto-Lock轉頭自鎖,3秒即可更換轉頭實(shí)現一機多用;Auto-ID瞬時(shí)轉頭自動(dòng)識別

·第三方認證Clickseal生物安全性密封技術(shù),防止氣溶膠產(chǎn)生,保護實(shí)驗人員的安全

·疲勞的Fiberlite轉頭,重量輕,硬度大,耐腐蝕,提供15年質(zhì)保,終身無(wú)需減速使用

 
 

近日,麻省綜合醫院(MGH)的研究人員開(kāi)發(fā)的一款新型微流體裝置。 該裝置可以利用微流控技術(shù)快速檢測血液中癌癥細胞來(lái)源的外泌體,以此作為癌癥診斷手段。

通訊作者Shannon Stott教授說(shuō),他們的設備能夠從在血液中數十億細胞外囊泡中挑選出腫瘤特異的細胞外囊泡。這將為未來(lái)癌癥診斷及監控提供新的方法。[1]

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由此看來(lái),外泌體的應用可謂是越來(lái)越廣泛了。這一技術(shù)也符合了當今醫療的熱點(diǎn)“液體活檢”思想, 應用前景可謂十分的光明。關(guān)于液體活檢,它另一個(gè)簡(jiǎn)單粗暴的名字叫“滴血驗癌”。想了解“液體活檢”的看官可以繼續關(guān)注我們的微信公眾號。我們往后會(huì )有詳細敘述。

 

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那么,超速離心技術(shù)在外泌體研究中到底是如何運用的呢?

用超速離心法純化外泌體

參考實(shí)驗流程

1.先取細胞培養液上清或體液作為樣本,低速離心300 xg,10 min,分離出細胞;留上清 2000 x g離心,10 min,去除死細胞。

2.剩下上清繼續提高離心力到10000 xg,30 min,去除細胞碎片,處理好后的上清可準備進(jìn)行超速離心步驟。以100,000 xg的離心力,離心70 min,得到粗制外泌體沉淀(含有少量雜蛋白)。

3.用PBS重懸外泌體沉淀,再次100,000 xg,離心70 min,即可得到純凈的外泌體。[2]

如何選擇合適的離心機進(jìn)行外泌體離心分離?

?Thermo Scientific™ Sorvall™ WX+ 系列超速離心機

的離心性能:大離心力達802,000 xg,滿(mǎn)足外泌體純化實(shí)驗需要

多樣的轉頭選擇,可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器,滿(mǎn)足您實(shí)驗室離心各種應用的需要,盡顯無(wú)以倫比的便捷性

Auto-Lock™ III 轉頭自鎖系統,3秒即可更換轉頭實(shí)現一機多用;Auto-ID瞬時(shí)轉頭自動(dòng)識別

第三方認證ClickSeal™生物安全性密封技術(shù), 防止氣溶膠產(chǎn)生保護實(shí)驗人員的安全

疲勞的Fiberlite™轉頭,重量輕,硬度大,耐腐蝕,提供15年質(zhì)保,終身無(wú)需減速使用

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